* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

гЕННАЯ ТЕРАПИЯ чЕРЕЗ ПЕчЕНЬ хождение антисенсолигонуклеотида экзогенно (антисенс-РНК образуется в клетке вследствие транскрипции веденного в клетку гена). Необходимо постоянное введение антисенсолигонуклеотида для достижения эффекта. Метод прост, высокоспецифичен (есть участки генома, встречающиеся всего один раз) и эффективен. Вместе с тем метод имеет ряд недостатков: плохое проникновение олигонуклеотидов через плазматическую мембрану; недостаточная стабильность природных олигонуклеотидов; неспецифическое связывание и образование частично комплементарных фрагментов (ингибирование нужных клеток РНК). Путем решения подобных проблем является создание фосфотиофосфатов, содержащих атом серы вместо кислорода в сахарофосфатном остове модифицированного олигонуклеотида, которые устойчивы к разрушительному действию ферментных систем. Наиболее перспективным вектором невирусной природы для Г. т. соматических клеток считается вектор, имитирующий хромосомы человека. Конечной целью исследований является создание искусственной сателлитной хромосомы (SATAC), которая позволила бы вводить в геном клеток человека неограниченные по протяженности рекомбинантные ДНК. Уже созданы дрожжевые искусственные хромосомы YAC (Yeast Artificial Chromosome). Искусственные сателлитные хромосомы должны иметь три главных компонента: участок репликации ori (origin of replication); центромеру – последовательность, обеспечивающую митотическую стабильность; теломеры – последовательности, обеспечивающие правильную репликацию и устойчивость к нуклеазам. Впервые метод с использованием антисенсолигонуклеотида был применен в 1978 г. для ингибирования репликации вируса саркомы Рауса при введении 13-звенного РНК олигонуклеотида, комплементарного мРНК вируса. генная терапия через печень * генная тэрапія праз печань * genetic therapy through the liver – методы использования клеток печени с целью проведения Г. т. ряда 249 заболеваний. Печень – важнейший метаболический орган. Одной из главных ее функций является секреция белков в кровь. Она также секретирует факторы свертывания крови VIII и I?, недостаток которых вызывает гемофилии А и В соответственно. Поэтому генно-инженерные клетки печени являются важной мишенью для вставки генов, компенсирующих дефект, вызываемый наследственными повреждениями. Печень обладает замечательной способностью к регенерации. После удаления 2/3 печени крысы уже через 2 недели она оказывается снова целой. При регенерации гепатоциты выходят из состояния покоя и начинают быстро пролиферировать. Поэтому считается, что печени стволовые клетки не нужны. В связи с этой особенностью и возможны генотерапевтические подходы с использованием гепатоцитов. Обычные неделящиеся гепатоциты не могут быть инфицированы ретровирусами, но когда они начинают пролиферировать, ретровирусы охотно их инфицируют. Уже получены отдельные примеры применения гепатоцитов в качестве мишеней для их ex vivo Г. т. Одной из наследственных болезней является рецессивная наследственная гиперхолистеренемия. Она вызывается дефектом гена, кодирующего рецептор липопротеинов низкой плотности (LDL-R). Это приводит к отсутствию этого рецептора в печени, в результате чего накапливается холестерин и возникают ранний атеросклероз и инфаркты миокарда. При геннотерапевтическом лечении больного, страдающего этим заболеванием, была проведена частичная гепатэктомия. В гепатоциты, полученные из его печени, с помощью ретровирусного вектора была введена кДНК нормального рецептора. После реинфузии рекомбинантных гепатоцитов в печень этому же пациенту через воротную вену наблюдали уменьшение содержания LDL, холестерина и отношения LDL к липопротеинам высокой плотности. Т. е. введенные клетки функционировали in vivo и осуществляли интернализацию и обмен холестеринов. При лечении наследственной тирозинемии первого типа (HTI) найдена