* Данный текст распознан в автоматическом режиме, поэтому может содержать ошибки

162 ВЕКТОРЫ НА ОСНОВЕ фАгА ? вектары, якія забяспечваюць экспрэсію чужародных генаў у клетках E. coli * vectors supplying expression of alien genes in E. coli cells – плазмиды, сконструированные для экспрессии целевых, или чужеродных, белков. Для успешной экспрессии в E. coli клонированных генов необходимо, чтобы а) кодирующая последовательность чужеродного гена была непрерывна, б) ген находился под контролем промотора, который узнается РНК-полимеразой E. coli и в) мРНК, считываемая с гена, правильно транслировала белок синтезирующим аппаратом E. coli. Организация сигналов инициации транскрипции и трансляции эукариотических и прокариотических генов существенно различается. Поэтому для достижения правильной экспрессии эукариотического гена в клетках E. coli необходимо кодирующую последовательность этого гена поместить под бактериальные сигналы экспрессии генов. В результате многолетних исследований были сконструированы плазмиды и создан ряд штаммов E. coli, в которых успешно экспрессируют чужеродные белки разной сложности. Векторы псевдоаденовирусные * вектары псеўдаадэнавірусныя * pseudoadenoviral vectors – аденовирусные векторы, содержащие минимальное количество регуляторных элементов и последовательностей, ответственных за упаковку и репликацию аденовируса. В. п. более безопасны, чем аденовирусные векторы (см. Векторы аденовирусные). Векторы растений * вектары раслін * plant vectors – специфика векторов для экспрессии рекомбинантных генов в клетках растений обусловлена, гл. обр., регуляторными последовательностями нуклеотидов, которые обеспечивают эффективную транскрипцию генов в растительных тканях. Напр., в известном векторе pCaMVCAT используются промотор и сайт полиаденилирования генов вируса мозаики цветной капусты, под контролем которых находится ген бактериальной хлорамфениколтрансферазы (cat). Этот ген-репортер применяется для оптимизации условий введения векторной ДНК в клетки растений фикации и разделения цепей исходного двухцепочечного фрагмента ДНК. Векторы на основе фага ? * вектары на аснове фага ? * phage ? based vectors – основным недостатком плазмидных векторов для клонирования является их малая емкость. Размер вставок клонируемой ДНК в плазмидных векторах не превышает нескольких тысяч пар оснований. Большие вставки ДНК в векторных плазмидах не стабильны, поэтому их размеры постепенно уменьшаются по мере увеличения числа циклов репликации таких рекомбинантных плазмид in vivo. В бактериальных клетках селективное преимущество получают те плазмиды, время репликации которых минимально. Вставки нуклеотидных последовательностей ДНК элиминируются при длительном культивировании рекомбинантных бактерий. Емкость клонирующих векторов была повышена с использованием хромосомы бактериофага ?. Векторы серий Charon, ?gt11 и EMBL обладают преимуществами перед плазмидными векторами: 1. Векторы на основе ДНК фага ? обладают значительно большей емкостью, в них можно клонировать фрагменты ДНК длиной от 5 до 25 т. п. о. 2. Фаговые частицы, содержащие упакованную ДНК, способны проходить литический цикл развития внутри бактериальных клеток и, следовательно, образовывать стерильные пятна (бляшки) на газоне бактерий. 3. Бляшки содержат в концентрированном виде сами фаговые частицы с упакованными в них рекомбинантными молекулами ДНК. 4. Бляшки содержат продукты метаболизма зараженных бактериальных клеток, включая белки и ферменты, которые появляются в результате экспрессии клонированных бактериальных генов. Векторы обезоруженные * вектары абяззброеныя * disarmed vectors – трансформационные векторы на основе Ti-плазмиды (см.), в которых T-ДНК или, по крайней мере, часть ее онкогенов, индуцирующих корончатые галлы (см.), удалена из плазмиды, но оставлены граничные последовательности T-ДНК. Векторы, обеспечивающие экспрессию чужеродных генов в клетках E. coli *